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¿Cómo usar pegamento de separación? - parte 2

Vistas:0     Autor:Editor del sitio     Hora de publicación: 2022-09-09      Origen:Sitio

Usar pegamento de separación

3 precauciones y problemas comunes:

1) El tamaño entre el papel de filtro, el pegamento y la membrana es generalmente papel de filtro> = membrana> = pegamento.

2) No debe haber burbujas entre el papel de filtro, el pegamento y la membrana, lo que causará cortocircuito.

3) Debido a la hidrofobicidad de la membrana, la membrana primero debe estar completamente humedecida en metanol. Además, la película debe mantenerse húmeda en todo momento en la operación posterior (excepto el método de película seca).

4) El papel de filtro se puede reutilizar. Hay muchas proteínas transferidas adsorbidas en el papel de filtro superior (membrana), por lo que los papeles del filtro superior e inferior no deben mezclarse. Si no se pueden distinguir, el papel de filtro de goma se puede reemplazar.

5) El tiempo de transferencia es generalmente 1.5 horas, (1 mma y cm2, 10% de gel), y el tiempo de transferencia y la corriente se pueden ajustar de acuerdo con el peso molecular.

1) Al laminar la película, el pegamento y los sándwiches de papel, operan en un plato grande con un búfer de película giratorio. Después de apilar, transfiera los tres al dispositivo de película giratoria en paralelo. No los mueva más, porque la posibilidad de burbujas ha sido completamente eliminada al operar en el búfer, por lo que no hay necesidad de conducir burbujas

2) Acerca del tiempo de transferencia de película: 20 V para rotación semi seca × 30 minutosProveedor de tubo de gel de suero - Smail

(b) Método húmedo

Básicamente no usamos este método, por lo que no lo presentaremos aquí.

C Identificación del efecto después de la metástasis

1. Glue Teñido

Después de tintar con el azul brillante de Coomassie y la decoloración con el destino, vea si todavía hay proteína en el pegamento para reflejar el efecto de la transferencia.

2. Película de tinte

Hay dos tipos de soluciones de tinte, reversibles e irreversibles. Los reversibles incluyen Ponceau-S Red, Fastgreen FC, CPTS, etc. Después de teñir con estos tintes, el pigmento se puede lavar y la membrana se puede usar para un análisis posterior. Pero los tintes irreversibles, como Coomassie Brilliant Blue, India Ink, Amido Black 10B, etc., y la película manchada no se puede utilizar para un análisis posterior.

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