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Diferencia entre gel concentrado y gel de separación

Vistas:0     Autor:Editor del sitio     Hora de publicación: 2022-09-05      Origen:Sitio

Diferencia entre gel concentrado y gel de separación

El valor de pH del gel concentrado es diferente del del gel de separación. El primero muestra principalmente el efecto de concentración, mientras que el segundo muestra el efecto de carga y el efecto de tamiz molecular. El efecto de concentración se completa principalmente en el gel concentrado. El pH del gel concentrado es 6.8. Bajo esta condición de pH, casi todos los cl iones de HCl en el tampón se disocian, y el punto isoeléctrico de Gly es 6.0. Solo unos pocos se disocian en iones negativos, que se mueven muy lentamente en el Costo del tubo de recolección de sangre del gel separador - Smailcampo eléctrico. Las proteínas ácidas se disocian en iones negativos a este pH, y la tasa de migración de los tres tipos de iones es CL> proteínas generales> Gly. Después de que comienza la electroforesis, los iones CL se mueven rápidamente, dejando atrás un área de concentración de iones baja. Gly se mueve muy lentamente en el campo eléctrico, lo que resulta en la falta de iones móviles, por lo que se forma una región de alto voltaje que falta de iones entre iones rápidos y lentos. Todos los iones negativos en la región de alto voltaje acelerarán su movimiento. Cuando se mueven a la región de ión de Cl, el alto voltaje desaparece y la velocidad de movimiento de la proteína se ralentiza. Después de establecer el estado estable anterior, la muestra de proteína se concentra entre los iones rápidos y lentos para formar una capa intermedia estrecha, se organiza en bandas de acuerdo con la cantidad de carga negativa transportada por la proteína. Después de que la muestra concentrada ingresa al gel de separación del gel concentrado, el pH del gel aumenta, el grado de disociación de Gly aumenta y la movilidad aumenta. Además, debido a que su molécula es pequeña, excede todas las moléculas de proteínas. Inmediatamente después de la migración de los cl -iones, la baja concentración de iones ya no existe, formando una resistencia constante al campo eléctrico. Por lo tanto, la separación de muestras de proteínas en el gel de separación depende principalmente de sus propiedades de carga, tamaño molecular y forma. El tamaño de poro del gel de separación tiene un cierto tamaño. Para las proteínas con una masa relativa diferente, el efecto de histéresis recibido al pasar es diferente. Incluso las partículas con cargas estáticas iguales separarán proteínas de diferentes tamaños entre sí debido al efecto de este tamiz molecular.

Diferencia entre el 10% y el 12% de separar el pegamento

Según el peso molecular de su proteína objetivo, si se trata de una proteína con un peso molecular más grande (por encima de 60kd), puede usar un pegamento al 10%, si se trata de una proteína con un peso molecular entre 60 y 30kd, puede usar 12 % de pegamento, y si es inferior a 30kd, generalmente uso el 15% de pegamento. El punto principal es que cuando la línea indicadora simplemente sale del fondo de goma, su proteína objetivo puede estar justo en el medio de la goma.

El tamaño de poro del gel correspondiente a diferentes concentraciones de gel también es diferente. El tamaño de poro con una pequeña concentración es grande, y el tamaño de poro con una gran concentración es pequeño. En general, el gel de separación es del 12% y el gel concentrado es del 5%, porque el propósito del gel concentrado es concentrar todas las proteínas en la misma línea de inicio y luego ingresar al gel de separación para la separación. Dependiendo del tamaño de la proteína.

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